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ELISA試劑盒的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所區(qū)別,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗通常均用板式點。 這篇文章將敘說板式ELISA各個操作過程的留意關(guān)鍵,ELISA檢查試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器合作運用。
按試劑盒闡明書的請求預(yù)備實驗中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水,包含用于洗刷的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液運用pH計丈量較正。從冰箱中取出的實驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次實驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保留。
ELISA試劑盒的制造:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書,留意每批的細(xì)節(jié)。在運用細(xì)胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地回收其間的細(xì)胞因子。根據(jù)每批闡明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。 通常待測抗原規(guī)范曲線的線性規(guī)模的可通過將規(guī)范品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫靡?guī)范的ELISA操作流程、擴大試劑盒、第三類試劑、或改動酶底物體系可在必定規(guī)模內(nèi)進步靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度,建議孵育規(guī)范品和標(biāo)本。若運用過氧化物酶作為顯色體系,應(yīng)禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
可用作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本非常廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體 或抗原成份。ELISA試劑盒有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清 、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物)。這些標(biāo)本搜集的時刻、辦法和保留都有必定的請求。