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ELISA檢測(cè)試劑盒操作不當(dāng)將引起較大的誤差。兔環(huán)磷酸腺苷酶免試劑盒,(cAMP)ELISA檢測(cè)試劑盒操作中應(yīng)注意以下5個(gè)方面。
1.隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng),因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測(cè)定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測(cè)中,還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不一致,對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大,不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機(jī)洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測(cè)讀儀(酶標(biāo)儀),比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng),根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片,以空白孔校零測(cè)定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性 正十八烷含量測(cè)定常溫,避光Y898970.2ml111636-200402
蛻皮甾酮含量測(cè)定常溫,避光Y8989810mg111638-200402
正己酸鑒別常溫,避光Y898990.2ml111641-200301
甲基丁香酚含量測(cè)定常溫,避光Y899000.2ml111642-200301
香葉醇含量測(cè)定常溫,避光Y899010.2ml111643-200301
D-半乳糖醛酸UV法含量測(cè)定常溫,避光Y8990250mg111646-200301
千金藤素含量測(cè)定常溫,避光Y8990320mg111647-200301
異亮氨酸鑒別常溫,避光Y8990420mg11649-
ELISA檢測(cè)試劑盒苯甲醛含量測(cè)定常溫,避光Y899050.5ml111650-200802
卡維丁含量測(cè)定常溫,避光Y8990620mg111651-200301
5-羥色胺鹽酸鹽含量測(cè)定常溫,避光Y8990720mg111656-200401